验孕棒需要等待几分钟

验孕棒需要等待几分钟 验孕棒等2-3分钟就可以出结果,这种验孕棒检测起来比较方便简单,而且可以反复检查。 一般情况下,用早晨的尿液检出率更高,虽然其他时间也可以检出,但相比较早上,尿中HCG值的浓度相对低一些...

验孕棒需要等待几分钟

验孕棒等2-3分钟就可以出结果,这种验孕棒检测起来比较方便简单,而且可以反复检查。

一般情况下,用早晨的尿液检出率更高,虽然其他时间也可以检出,但相比较早上,尿中HCG值的浓度相对低一些,特别是停经时间比较短的时候,所以女性检查后不放心还可以到医院妇科做血HCG的检查,有利于动态的观察和复查。

查了尿HCG或者血HCG之后还有B超的检查,B超的检查可以明确诊断,也可以明确妊娠的状态,这样有利于后续的产前检查和产前筛查的确定。

使用验孕棒的女性要注意在收集晨尿之前2个小时不要喝太多的水,以免引起尿液稀释,在临床上出现假阳性的结果,此外可多次进行检测,提高准确性,更终以医院检查结果为准。

验孕棒需要等待几分钟

假阳性和真阳性的图片

前言随着新冠疫情的持续,目前全国各大中小型医院大多已具备核酸检测能力。

假阳性和真阳性的图片

核酸检测作为新冠确诊的金标准,却具有奇高的假阴性率,对于“假阴性”这里不做过多阐述。

那么目前面对大批量样本的临床检测,作为核酸检测人员,你能确定你做出的“阳性”就一定不是“假阳性”吗?案例经过2020年7月2号,我院第一次正式开展新型冠状病毒核酸检测工作。

在此之前本科室先后抽调3名工作人员前往其他单位协助进行核酸检测工作,工作流程及操作方面已准备充分。

我很荣幸参与到这项工作中,成为科室的“先头兵”。

收集样本、核对名单、样本编号、试剂配制、实验操作、上机扩增、实验室消毒,一切按照我所预期的剧本进行着,期待着所有样本呈阴性,然后发报告、顺利下班。

可当结果出来以后,却发现我拿的剧本好像出了点问题,“小插曲”出现了。

见下图:第一批次20号样本—阈值,—FAM通道,—VIC通道,—ROX通道图1FAM通道ct值为14.98、代表新冠ORF-1ab基因VIC通道ct值为17.04、代表新冠N基因ROX通道ct值为28.05、代表管家基因我们采用的试剂为上海伯杰新冠核酸检测试剂,其说明书给出的阳性参考值为ct≤38、仅从ct值方面判断,该样本新型冠状病毒核酸检测为阳性。

图2 图3阴阳性对照曲线见下图:图4 阳性对照图5 阴性对照阴阳性对照结果无异常,那么20号样本新冠核酸检测结果是“真阳性”吗?

案例分析本批次共检测90个样本,除20号样本外,还有其他7个样本的曲线也出现尾部抬高现象,如1号和4号样本,见下图:图6 1号样本 图7 4号样本其他样本曲线正常,如6号样本,见下图:这8个样本为何会出现这种异常曲线?

这些样本的检测结果是“真阳性”还是“假阳性”?

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有没有可能是仪器出现故障?

或是操作过程被阳性对照污染?

一连串问号在我脑子里疯狂快速地打着转。

带着这些疑问,我查看了各样本的原始曲线(上图中的曲线是经过处理的相对曲线)

1、正常样本的原始曲线图从上图8可见,FAM通道和VIC通道基本为一条直线,ROX通道基线期、指数增长期和平台期分隔明显,符合标准的S型曲线。

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2、异常样本原始曲线图图9 20号样本 图10 1号样本这两个样本的曲线有个共同点,它们的FAM和VIC通道曲线不符合标准S型曲线,基线期、指数增长期、平台期无明显分隔。

其它异常样本曲线同上。

从这个曲线图来看,我开始怀疑这些异常样本ct值的真实性了。

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于是把所有异常样本找出,和第二批样本一起进行复查。

复查结果出来了,可结果却让我更加疑惑了。

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复查的20号样本结果变为标准阴性,可第二批样本中出现了更多和之前一样的异常曲线,总共检测96个样本,出现了12个异常曲线,曲线特点和第一批一样,如下图:图11 第二批12号相对曲线 图12 第二批12号原始曲线图13 第二批16号相对曲线 图14 第二批16号原始曲线出现第二次异常曲线后,我静下心来整理思绪,开始分析原因:

1、试剂配制过程试剂配制完全按照操作流程规范操作,无原则性错误。

2、核酸提取过程样本经56℃灭火30min后进行核酸提取,吸样操作规范,核酸提取在全自动核酸提取仪中进行,减少了人为操作误差。

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3、扩增仪存在故障?

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扩增仪在正式投入使用之前做了两次测试及性能验证,但考虑到并没有测试所有孔位,马上怀疑是否个别孔位温控系统或者读取荧光系统存在缺陷。

当即对照了第一批和第二批出现异常曲线的孔位,第一批次8个异常样本,第二批次12个异常样本,且两个批次的异常样本重复孔位少见。

导致突然燃起的一丝曙光又破灭了。

实在找不出问题所在,只得打电话求助仪器工程师。

工程师怀疑更后上机的反应管中存在气泡导致荧光读取受到干扰。

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由于在上机扩增前我们已经对反应管离心处理,所以对这个解释我是抱有一丝怀疑的态度的。

虽然有点怀疑,但还是不自主的拿出仪器中扩增完成的反应管看了一下,也许经过高温扩增以后还能看到几个大气泡也说不定。

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事实证明,我的第六感“怀疑”没错,气泡倒是没有看到,但我看到了真相。

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图15 扩增完成的反应管图15中所标示的

1、2分别是两个异常曲线样本,仔细看可以发现,这两反应管中的反应液面要低于其他管,每个反应管中加入的总体积应该是25ul,可它俩的液体量为什么会少些?

遂查看其他异常样本,发现每个异常样本反应液都或多或少的减少了,而且减少的液体量越多,ct值越小。

真相似乎离我越来越近了,回过头再查看我们使用的八连管,却发现一个令人哭笑不得的问题:这两批样本使用的八连管与八连管盖不是同一厂家产品。

我瞬间顿悟,由于实验室有其他项目采用的不同厂家试剂,而且都会配送八连管,从外型看两者没多大区别,我们在操作时使用了不同厂家的管与盖,导致个别孔位管与盖不密封,扩增途中经高温使液体蒸发。

从工程师处得知,该实时荧光定量PCR仪从样本顶部读取荧光值,难道是因为这些反应管不密封导致管中反应液蒸发出来,干扰顶部荧光读取?查阅资料,发现并没有相关报导,无从考证。

对之前的粗心大意予以纠正后进行第三次检测,结果如我所愿,不再出现之前的异常曲线,所有复查样本均为阴性。

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如下图图16 复查样本在之后的检测中,类似情况再未出现,可确定本次检测为使用不配套的八连管与盖导致的假阳性结果,而其导致假阳性的具体原理还有待进一步探讨。

总结造成PCR假阳性问题的因素相对单一, 由于PCR的敏感性和效率特别高, 只要有少的扩增产物将标本或反应管污染即可出现假阳性, PCR仪器的性能差异和温控不准等质量问题造成非特异性扩增也会导致假阳性现象。

如果样本采集和PCR试剂配制及反应实验过程中, 引物设计不合理, 选择的扩增列序与非目的性扩增列序具有同源性, 检测样品出现交叉污染、PCR试剂污染或PCR扩增产物污染、气溶胶污染以及实验室中克隆质粒污染都会造成假阳性现象出现。

[1]除此之外在整个实验的操作过程中必须严格按照SOP执行,避免出现像我们一样的低级错误而导致实验结果假阳性。

参考文献[1]郑甲兰。

PCR检测中的假阳性和假阴性问题分析[J]。

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国内医药指南,2012,10(22):390-39

1、编辑 想当摄影师的检验师审核 壹加壹小绵羊 武汉胖纸医僧作者丨刘强单位丨怀化市肿瘤医院。

验孕棒假阳性的可能性

一般情况下,验孕试纸假阳性可能性不是很高。

尿中人绒毛膜促性腺激素超过25mIU/ml,通常则会被检测到。

但是因为尿液浓度会影响检出率,所以一般建议用早上第一次尿液检测,这个时间的尿液经过一夜的浓缩,尿中的激素浓度通常为全天中更高,容易被检测到。

正因为尿液浓度会影响检出率,所以可能会出现假阴性的情况,实际上验孕试纸发生假阴性的几率要比假阳性高。

当使用验孕试纸,发现阳性或者弱阳性时,建议作如下处理。

1、试纸阳性:试纸是定性试验,如果试纸显示为阳性,则通常表示怀孕,但是试纸的准确率不如抽血准确,而且也无法定量检测,不能判断孕周。

对于月经不准的女性,用试纸检测后发现怀孕,有必要到医院进行抽血检查,可以作为计算孕周的参考,对计算预产期有一定的价值,2、试纸弱阳性:试纸显示为弱阳性,一般也表明怀孕,但是有些时候试纸第二条线特别浅,似有似无,难以辨认,这个时候需要复测。

验孕棒假阳性的可能性

建议在第二天或者第三天用晨尿进行复测,若依然显示阳性,建议再到医院进行确诊。

需要注意的是,有些女性家中既有排卵试纸又有验孕试纸,有时可能错把排卵试纸当成验孕试纸,造成假阳性的失误,所以在用之前一定检查一下,避免用错。

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